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液相色谱流动相使用时的10个坏习惯,你中招了吗?

发布时间:2021-03-19 浏览次数:0

我们在使用液相色谱仪的时候,经常会很粗心的犯一些自己都不容易发现的问题,今天小编就针对液相色谱仪的流动相使用时常犯的错误进行一个总结。
1.加入有机相之后再测量流动相的PH值
通常情况下测量流动相的PH值,是测量水相中的PH值参数。有机相加入之后PH值参数的测量就和之前有误差。但如果能保证每次测量都是加入相同量的有机相之后得到的PH值,虽然这不能保证精确度,但是这能保证前后一致的测量结果,所以这样也没有问题。
2.不使用缓冲盐
缓冲盐的加入是用来控制和修正流动相中PH值的改变的。样品基质、空气中的CO2、水中的杂质都会造成流动相PH值的改变,而PH值的改变会影响样品的保留、峰形、峰面积参数。
3.没有在正确的缓冲区间使用缓冲盐
每个缓冲盐都有一定的缓冲范围,在此范围内它提供了最佳的pH稳定性。在这个范围外,缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以要么在正确的范围内使用缓冲盐,要么选择一个缓冲范围覆盖所需pH值的缓冲盐。
4.向有机相中加入缓冲盐
如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中,会大大增加缓冲盐析出的风险。缓冲盐的析出在初期可能并不明显,但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。
5.梯度洗脱时直接用泵去混合流动相并且流动相比例从0%开始
现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始,会有比较大的出现气泡和沉淀的风险。
6.没有使用正确的pH值修饰酸或碱作为缓冲液
缓冲溶液的修饰酸或碱,只使用生成缓冲盐的酸或碱。例如,磷酸钠缓冲液只能用磷酸或氢氧化钠调节。
7.没有在方法中说明缓冲液的全部信息
例如只在方法中写“称5克磷酸钠溶入1000毫升水”。缓冲盐的类型决定其pH缓冲范围,而缓冲盐中所需物质的浓度决定了缓冲强度。例如:5g的无水磷酸钠和5g的一水磷酸钠具有不同的缓冲强度,会影响保留率。
8.使用仪器时不调查之前使用的流动相情况,直接用纯有机溶剂冲系统
如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液,而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂,那么就会造成该通道缓冲盐析出、出现堵塞等风险。
9.将溶剂瓶中的流动相用干为止
溶剂瓶中的流动相如果用干,会导致仪器中出现气泡等问题。
10.仅使用超声来给流动相脱气
超声脱气有一定的脱气作用,但完全脱气的效果并不理想。所以在此建议使用真空脱气机进行在线脱气。
这10个关于液相色谱仪流动相的常规错误你记住了吗,在实验操作过程中一定要规避,避免造成对实验结果的不准确行。
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